2018年36期

水稻OsVDAC4誘餌蛋白載體的構建及鑒定

作  者 白雪琪,譚艷平,覃永華,王亞楠,楊 武,龔秋涵,劉學群,王春臺
第一作者 白雪琪
作者單位 中南民族大學生命科學學院,湖北武漢
卷  號 47
發表年份 2018
發表刊期 36
發表頁面 90-94,124
關  鍵  字 OsVDAC4;誘餌蛋白載體;膜蛋白酵母雙雜交
摘  要 [目的]獲得可用于篩選膜蛋白酵母雙雜交文庫的誘餌蛋白載體。[方法]在對OsVDAC4進行生物信息學分析的基礎上,將OsVDAC4全長ORF分別與pBT3-N和pBT3-SUC連接,構建2個誘餌蛋白載體pBT3-OsVDAC4-N-Cub和pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub,利用膜蛋白酵母雙雜交技術鑒定出可用于篩庫的誘餌蛋白載體。[結果]pBT3-OsVDAC4-N-Cub和pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub都可以與目標蛋白互作,但由于OsVDAC4的N端有約50個可自由伸展的氨基酸殘基導致pBT3-OsVDAC4-N-Cub本底反應非常強,OsVDAC4的C端存在于膜中而沒有可自由伸展的氨基酸殘基,pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub的本底反應很弱。[結論]pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub可用于文庫篩選,這為獲取OsVDAC4的互作蛋白提供了基礎。
附  件 水稻OsVDAC4誘餌蛋白載體的構建及鑒定
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