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2019年05期
蠟狀芽孢桿菌環糊精糖基轉移酶的基因克隆表達·酶學特性及定點突變研究
| 作 者 | 花敬涵，楊靜文，胡雪芹，張洪斌 |
| 第一作者 | 花敬涵 |
| 作者單位 | 合肥工業大學食品與生物工程學院，安徽合肥 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 5 |
| 發表頁面 | 110-115，126 |
| 關 鍵 字 | β-環糊精糖基轉移酶；克隆；表達；定點突變 |
| 摘 要 | 研究克隆、表達了蠟狀芽孢桿菌來源的環糊精糖基轉移酶（cyclodextrin glycosyltransferase，CGTase，EC 2.4.1.19）基因，研究了其酶學性質，并在此基礎上構建突變菌株以探究關鍵氨基酸位點與產物特異性的關系。結果表明，重組CGTase的最大比活力達5 292 U/mL，分子量約為68 kDa，最適溫度和pH分別為55 ℃和8.5；以淀粉為底物催化合成的主要產物是β-環糊精（β-CD）；通過序列對比選取了第47位氨基酸（Ala）進行定點突變，構建了A47R、A47M、A47S、A47Y。研究發現活性區域中第47位氨基酸對于產物特異性和產量具有一定的影響，其中親水性氨基酸更利于CDs（尤其β-CD）的合成，這為酶法合成β-CD的工業應用提供了方法。 |
| 附 件 |
蠟狀芽孢桿菌環糊精糖基轉移酶的基因克隆表達·酶學特性及定點突變研究
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