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2019年09期
檉柳cpSSR-PCR反應體系的建立和優化
| 作 者 | 張如華，張連梅 |
| 第一作者 | 張如華 |
| 作者單位 | 臨沂大學生命科學學院，山東臨沂 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 9 |
| 發表頁面 | 105-107 |
| 關 鍵 字 | 檉柳；葉綠體微衛星；反應體系；正交試驗 |
| 摘 要 | ［目的］建立并優化檉柳cpSSR-PCR反應體系和反應條件。［方法］對影響PCR反應的5個變量（Mg2+ 濃度、dNTPs濃度、Taq DNA聚合酶濃度、引物濃度、模板DNA濃度）進行L16（45）正交試驗設計，并對引物退火溫度進行梯度篩選。［結果］最優反應體系：Mg2+ 2.0 mmol/L、dNTPs 0.125 mmol/L、Taq DNA聚合酶 0.25 U、引物 0.25 μmol/L、模板 DNA 20 ng，共10 μL。反應程序：94 ℃預變性4 min；94 ℃ 30 s，引物退火溫度30 s，72 ℃ 30 s，30個循環；72 ℃延伸10 min。［結論］該反應體系成功擴增1個檉柳天然群體的23個個體，為檉柳群體擴散路線的確定奠定基礎。 |
| 附 件 |
檉柳cpSSR-PCR反應體系的建立和優化
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