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2019年10期
Cdh1和Num1過表達菌株的構建
| 作 者 | 李巧巧，龐文穎，海力，唐仙英 |
| 第一作者 | 李巧巧 |
| 作者單位 | 中南民族大學生命科學學院，武陵山區特色資源植物種質保護與利用湖北省重點實驗室，生物技術國家民委重點實驗室，湖北武漢 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 10 |
| 發表頁面 | 1-4,9 |
| 關 鍵 字 | 過表達；酵母四分體解離；Cdh1；Num1 |
| 摘 要 | ［目的］研究Cdh1和Num1之間是否存在相互作用，構建用于Cdh1和Num1免疫共沉淀試驗的過表達菌株。［方法］首先在酵母菌株YWL630中用GAL1和3HA對CDH1進行標記，構建GAL1-3HA-CDH1 NUM1-GFP菌株，再利用酵母四分體解離的方法使菌株YWL63和YWL490分別與該菌株雜交并進行四分體解離，從而得到所需菌株。［結果］成功構建不同基因型和配型的重組酵母菌株，其中YT52成功過表達了約340 kD的Num1，YT53成功過表達了340 kD的Num1和75 kD的Cdh1，YT57成功過表達了75 kD的Cdh1。［結論］經過同源重組的方法成功標記CDH1并誘導蛋白過表達，通過酵母四分體解離的方法構建用于Cdh1和Num1互作試驗的過表達菌株，為揭示APC/C是否介導Num1的降解及機制奠定基礎。 |
| 附 件 |
Cdh1和Num1過表達菌株的構建
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