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2019年24期
青藏高原放牧家畜小腸結腸炎耶爾森氏菌LAMP檢測方法的建立及應用
| 作 者 | 蔡其剛，唐一波，高小龍，仝麗娜，趙靜，張紅見 |
| 第一作者 | 蔡其剛 |
| 作者單位 | 青海大學畜牧獸醫科學院，青海西寧 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 24 |
| 發表頁面 | 107-110 |
| 關 鍵 字 | 放牧家畜；小腸結腸炎耶爾森氏菌；LAMP；outL基因；敏感性；特異性 |
| 摘 要 | 為了建立特異性、敏感性和適用性強的LAMP檢測方法，采用分子生物學方法，根據GenBank數據庫中該細菌的outL基因，進行了多序列比對和保守區域確定。根據其保守序列，在線設計和篩選了一套LAMP引物。溫度優化及特異性和敏感性驗證后建立了檢測該病菌的LAMP檢測方法，并對青藏高原放牧牛、羊臨床糞便樣品進行了檢測。結果表明，LAMP檢測方法的最適溫度為63 ℃；檢測其與大腸桿菌、沙門氏菌、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌、多殺性巴氏桿菌及蠟樣芽胞桿菌無交叉反應；檢測下限為100 fg目的基因；利用建立的方法檢測了208份放牧牦牛、藏羊糞便DNA樣品，共檢測到26份陽性樣品，陽性率為12.5%。這表明成功建立了一種檢測該病的特異性、敏感性和適用性強的LAMP檢測方法。 |
| 附 件 |
青藏高原放牧家畜小腸結腸炎耶爾森氏菌LAMP檢測方法的建立及應用
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