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2020年09期
雞細小病毒與H9亞型禽流感病毒二重PCR檢測方法的建立
| 作 者 | 李丹，謝芝勛，李孟，羅思思，謝麗基，張民秀，黃嬌玲，范 晴，王 盛，謝志勤，鄧顯文，曾婷婷，張艷芳 |
| 第一作者 | 李丹 |
| 作者單位 | 廣西壯族自治區獸醫研究所，廣西南寧 |
| 卷 號 | 48 |
| 發表年份 | 2020 |
| 發表刊期 | 9 |
| 發表頁面 | 113-116 |
| 關 鍵 字 | 雞細小病毒；H9亞型禽流感病毒；二重PCR |
| 摘 要 | ［目的］建立一種能夠同時診斷雞細小病毒（chincken parvovirus，ChPV）和H9亞型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的檢測方法。［方法］根據GenBank中已發表的ChPV NS基因、H9亞型AIV HA基因的保守序列，分別設計多對引物，并通過一系列不同組合對溫度和反應體系的調整試驗，最終篩選出2對最佳特異性引物組合，建立了ChPV和AIV二重PCR檢測方法用于ChPV和H9亞型AIV的檢測。［結果］特異性和敏感性的試驗結果表明，建立的二重PCR方法特異性良好，可以在一管PCR反應同時檢測ChPV和H9亞型AIV。針對ChPV NS基因和H9亞型AIV HA基因的擴增片段大小分別為558和367 bp，其他常見的禽病病原體均未見陽性反應；該法對ChPV和H9亞型AIV的檢測下限均為5×104拷貝/μL質粒；臨床樣品檢測結果表明，對140份臨床樣品檢測結果與AIV分離測序及ChPV PCR陽性產物測序結果完全一致。［結論］建立的ChPV和H9亞型AIV 二重PCR檢測方法不僅特異性良好，而且檢測的靈敏度高，對ChPV和H9亞型AIV的監測及有效防控具有重要意義。 |
| 附 件 |
雞細小病毒與H9亞型禽流感病毒二重PCR檢測方法的建立
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