2020年11期

細菌纖維素合成菌納塔葡糖酸醋桿菌遺傳操作方法的建立

作  者 謝文平,鮑素敏,劉權,張鴻
第一作者 謝文平
作者單位 東莞市東陽光生物合成藥有限公司,廣東東莞
卷  號 48
發表年份 2020
發表刊期 11
發表頁面 1-6
關  鍵  字 細菌纖維素;納塔葡糖酸醋桿菌;電轉化;基因敲除
摘  要 [目的]建立納塔葡糖酸醋桿菌遺傳操作系統,為采用基因工程方法改造該類菌株,提高纖維素產量,提升纖維素品質提供參考依據。[方法]通過優化培養基確定菌株電轉化感受態制備條件,采用質粒或者線性化片段在不同電壓下進行轉化,優化最佳轉化條件。[結果]采用添加了1%纖維素酶的C2培養基進行1次搖瓶轉接,可有效制備納塔葡糖酸醋桿菌電轉化感受態;采用攜帶同源臂及Kan抗性基因的環狀質粒或者線性化片段均實現了對納塔葡糖酸醋桿菌葡萄糖脫氫酶基因(GDH)的同源雙交換基因敲除;GDH基因的敲除降低了工程菌株發酵產纖維素膜過程的葡萄糖酸產生,提高了細菌纖維素的最終產量及品質。[結論]成功建立了納塔葡糖酸醋桿菌遺傳轉化方法和基因敲除方法。
附  件 細菌纖維素合成菌納塔葡糖酸醋桿菌遺傳操作方法的建立
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