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2020年20期
基于分子對接技術的抗新霉素單鏈抗體制備和進化
| 作 者 | 王方雨，張運尚，胡曼，樊劍鳴 |
| 第一作者 | 王方雨 |
| 作者單位 | 河南農業科學院動物免疫學重點實驗室，河南鄭州 |
| 卷 號 | 48 |
| 發表年份 | 2020 |
| 發表刊期 | 20 |
| 發表頁面 | 103-107,150 |
| 關 鍵 字 | 單鏈抗體；氨基糖苷類抗生素；藥物殘留檢測；分子識別機制；間接競爭酶聯免疫吸附法 |
| 摘 要 | 為了制備高靈敏度、高特異性的抗新霉素單鏈抗體，試驗采用從雜交瘤細胞中提取單鏈抗體基因，轉入大腸桿菌表達系統進行表達。然后采用分子對接的方法研究抗新霉素單鏈抗體和新霉素分子的識別機制并進行虛擬突變，將關鍵結合位點的氨基酸殘基進行突變，在對突變體進行表達和純化后建立間接競爭酶聯免疫吸附分析方法。結果表明：氨基酸殘基Leu227為單鏈抗體與新霉素結合的關鍵氨基酸殘基，將其突變為Asp，獲得突變體。IC50為1.58 ng/mL，相比于親本單鏈抗體的26.23 ng/mL，突變體的敏感性提高了16.6倍。試驗成功制備了高靈敏度、高特異性的抗新霉素單鏈抗體，為動物源性食品中的抗生素殘留檢測提供了研究基礎。 |
| 附 件 |
基于分子對接技術的抗新霉素單鏈抗體制備和進化
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