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2022年02期
1株假單胞菌oprD基因缺失和回補載體的構建
| 作 者 | 朱艷容，劉志新，楊靖，韓韻，陳果，徐祥 |
| 第一作者 | 朱艷容 |
| 作者單位 | 湖北醫藥學院基礎醫學院，湖北十堰 |
| 卷 號 | 50 |
| 發表年份 | 2022 |
| 發表刊期 | 2 |
| 發表頁面 | 109-111,117 |
| 關 鍵 字 | 假單胞菌；毒力因子；基因敲除；基因回補 |
| 摘 要 | ［目的］構建假單胞菌毒性基因（oprD）缺失突變株，為進一步探討其編碼的毒力因子功能奠定基礎。［方法］利用pEX18Gm質粒作為基因敲除的載體，構建假單胞菌oprD 基因重組自殺質粒，通過同源重組并激活自殺基因方式，篩選到目的基因缺失的突變株，再利用pBBR1MCS-2質粒作為目的基因回補的載體，構建回補載體。［結果］同源重組后，經過慶大霉素和氯霉素雙抗平板、蔗糖平板篩選和PCR鑒定，成功獲得了oprD基因缺失突變株，類似操作獲得了回補菌株。［結論］基因缺失突變株的成功構建可為下一步的毒性機理研究奠定基礎。 |
| 附 件 |
1株假單胞菌oprD基因缺失和回補載體的構建
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