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2014年07期
辣椒SRAPPCR反應體系優化及雜交群體多態性引物篩選
| 作 者 | 張佳琦，呂慶芳，董黎梨，李映志，葉春海 |
| 第一作者 | 張佳琦 |
| 作者單位 | 廣東海洋大學，廣東湛江 |
| 卷 號 | 42 |
| 發表年份 | 2014 |
| 發表刊期 | 7 |
| 發表頁面 | 1913-1916，1920 |
| 關 鍵 字 | 辣椒（Capsicum spp.）；正交試驗設計；單因素隨機試驗設計；SRAP；PCR |
| 摘 要 |
［目的］對辣椒SRAP反應體系進行研究和優化，并利用優化體系對164對多態性引物進行篩選。［方法］采用單因素隨機試驗設計和L25(65)正交試驗設計對辣椒SRAP反應體系中6種關鍵因素（退火溫度、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA）進行體系優化，并以“泡椒”ד青皮大椒”的親本和F1代為材料，利用聚丙烯胺酰胺凝膠進行篩選。［結果］辣椒SRAPPCR的最佳反應體系為：退火溫度35.5 ℃，Taq DNA聚合酶1.0 U，模板DNA 2.25 ng/μl，dNTPs 0.2 mmol/L，引物0.4 μmoL/L，Mg2+ 2 mmol/L，總體積為20 μl。利用該體系，從164對SRAP引物組合中篩選出擴增條帶清晰、多態性豐富、條帶穩定的31對引物組合。［結論］該體系的建立與多態性引物組合的篩選為SRAP標記技術在辣椒育種中的應用奠定了基礎。 |
| 附 件 |
辣椒SRAPPCR反應體系優化及雜交群體多態性引物篩選
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