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2016年17期
載體濃度和感受態對大分子載體轉化效率的影響
| 作 者 | 覃鴻妮，張蘭蘭 |
| 第一作者 | 覃鴻妮 |
| 作者單位 | 蘇州工業園區服務外包職業學院,江蘇蘇州 |
| 卷 號 | 44 |
| 發表年份 | 2016 |
| 發表刊期 | 17 |
| 發表頁面 | 181-186 |
| 關 鍵 字 | 大分子載體；載體濃度；感受態； 轉化效率, |
| 摘 要 | ［目的］研究載體量和感受態對陽性克隆率的影響。［方法］利用引物拼接PCR技術，自行設計26條引物合成一個835 bp的目的基因，將該基因與約20 kb的大分子載體連接構成重組質粒。在1 500 ng目的基因底物量的基礎上，設置50、100、150、200、250、300 ng 6個梯度載體量，得到的重組反應產物再轉化入Top10F′、DH5α、Stbl3、Epi400、JM108、SCSI 6種不同的感受態中， 組成36個試驗組合。［結果］ 不同載體量陽性克隆率由大到小依次為200、250、300、150、100、50 ng，200 ng的陽性克隆率最高可達75%，平均達28.5%。不同感受態細胞陽性克隆率由大到小依次為Stbl3、Top10F′、DH5α、JM108、Epi400、SCSI，Stbl3在任何載體濃度下均高于其他感受態，平均陽性克隆率為42.4%。［結論］載體量和感受態均明顯影響陽性克隆率，最佳組合為200 ng的載體分子量配合Stbl3感受態，陽性克隆率可達75%。 |
| 附 件 |
載體濃度和感受態對大分子載體轉化效率的影響
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