2017年04期

應用TALENs技術定向敲除煙草eIF4E6基因

作  者 宋琳娜,楊鵬九,萬秀清,喬嬋,潘洪杏,郭振楠,劉俠,郭兆奎,李若
第一作者 宋琳娜
作者單位 牡丹江師范學院,黑龍江牡丹江
卷  號 45
發表年份 2017
發表刊期 4
發表頁面 142-146
關  鍵  字 煙草;PVY;K326;eIF4E-6基因;TALENs,
摘  要 [目的]利用TALENs技術定向敲除煙草eIF4E-6基因,為提高優質烤煙品種K326 的馬鈴薯Y病毒(PVY)抗性提供材料。 [方法]構建特異靶向煙草eIF4E-6基因的TALENs載體,并由農桿菌介導轉化K326煙草,用PCR和克隆測序方法篩選目的基因被成功編輯的T0代轉基因煙株。 [結果]構建了2個特異靶向eIF4E-6基因的TALENs載體T3和T4。2個載體各獲得了約40和50株陽性轉化的K326 T0代煙株。T3載體獲得1株目的基因靶位點發生大片段堿基缺失的雜合突變型T0代單株、3株靶位點發生堿基替換的雜合突變型T0代單株。T4載體獲得5株靶位點發生堿基替換的雜合突變型T0代單株。 [結論]利用TALENs技術獲得的eIF4E-6基因雜合突變型K326 T0代單株為后續獲得純合基因敲除的K326煙草,并最終獲得PVY病毒抗性改良的K326煙草材料奠定了基礎。
附  件 應用TALENs技術定向敲除煙草eIF4E6基因
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