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2017年12期
牛病毒性腹瀉黏膜病毒E2基因的原核表達與免疫原性分析
| 作 者 | 王宇婷，馬莉莉，李曉月，王士霞，畢瑩，倪宏波 |
| 第一作者 | 王宇婷 |
| 作者單位 | 黑龍江八一農墾大學，動物科技學院，黑龍江大慶 |
| 卷 號 | 45 |
| 發表年份 | 2017 |
| 發表刊期 | 12 |
| 發表頁面 | 122-123,129 |
| 關 鍵 字 | 牛病毒性腹瀉黏膜病毒；E2基因；原核表達,, 牛病毒性腹瀉黏膜病毒；E2基因；原核表達,, 牛病毒性腹瀉黏膜病毒；E2基因；原核表達,, 牛病毒性腹瀉黏膜病毒；E2基因；原核表達, |
| 摘 要 | ［目的］原核表達牛病毒性腹瀉黏膜病毒（BVDV）E2基因編碼蛋白。［方法］采用PCR方法從BVDV中擴增E2基因片段，與原核表達載體pET-32a連接，構建重組表達質粒pET-32a-E2，轉化E.coli(Rosetta)感受態細胞，重組菌用1 mmol/L IPTG誘導表達E2蛋白，進行SDS-PAGE電泳，并用Ni-NTA親和層析柱純化目的蛋白，經Western blot分析鑒定免疫原性。［結果］重組質粒pET-32a-E2經PCR及酶切鑒定證明構建正確，重組質粒能夠在大腸桿菌中大量表達，表達產物的分子質量大小約為58 kDa,純化后E2重組蛋白濃度0.521 mg/mL,Western blot分析表明，其能被BVDV陽性血清識別，具有很好的免疫原性。［結論］E2蛋白成功表達，為后續建立BVDV檢測方法奠定了基礎。 |
| 附 件 |
牛病毒性腹瀉黏膜病毒E2基因的原核表達與免疫原性分析
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