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2017年13期
斑石鯛卵鞭蟲病病原的分子鑒定與系統發育分析
| 作 者 | 付泉潔，范超，謝國駟，葉仕根，史成銀 |
| 第一作者 | 付泉潔 |
| 作者單位 | 大連海洋大學水產與生命學院，遼寧大連 |
| 卷 號 | 45 |
| 發表年份 | 2017 |
| 發表刊期 | 13 |
| 發表頁面 | 135-140 |
| 關 鍵 字 | 斑石鯛；眼點淀粉卵渦鞭蟲；核糖體DNA；分子鑒定；系統發育分析, |
| 摘 要 | ［目的］對嚴重危害斑石鯛魚苗的卵鞭蟲病病原——渤海分離株（Bohai-1407 isolate）進行分子生物學鑒定和系統發育分析。［方法］設計4對特異性引物，應用PCR方法克隆并測定渤海分離株的核糖體DNA（rDNA）序列；應用Blast比對分析渤海分離株rDNA的結構；依據rDNA序列，分別構建10種胚溝科鞭毛蟲和19株眼點淀粉卵渦鞭蟲分離株/克隆的系統發育樹，分析渤海分離株的系統分類地位。［結果］擴增出了渤海分離株的4個DNA片段，拼接出長度為6 530 bp的rDNA操縱子序列；該操縱子由74 bp的部分外轉錄間隔區（ETS）、1 813 bp的小亞基（SSU）、352 bp的內轉錄間隔區1（ITS1）、159 bp的5.8S、698 bp的內轉錄間隔區2（ITS2）和3 388 bp的大亞基（LSU）串聯而成，3′端還有46 bp的部分非轉錄間隔區（NTS）；渤海分離株與眼點淀粉卵渦鞭蟲寧德株（Ningde1412）的rDNA序列相似性高達99.5%；依據SSU序列建立了包含10種胚溝科鞭毛蟲的系統發育樹，渤海分離株與世界各地分離到的眼點淀粉卵渦鞭蟲聚類在一起，將其鑒定為眼點淀粉卵渦鞭蟲；依據ITS1和ITS2序列建立了包含19株眼點淀粉卵渦鞭蟲的2個系統發育樹，渤海分離株與從美國弗羅里達鹽水池塘中分離到的墨西哥灣分離株FL_21（DQ490260.1）總是聚類在一起。［結論］斑石鯛卵鞭蟲病的病原——渤海分離株可以鑒定為眼點淀粉卵渦鞭蟲，該分離株與墨西哥灣分離株FL_21的親緣關系最近。 |
| 附 件 |
斑石鯛卵鞭蟲病病原的分子鑒定與系統發育分析
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