2017年15期

水環境中諾如病毒RT-LAMP快速檢測方法的建立及應用

作  者 羅鴻斌
第一作者 羅鴻斌
作者單位 東莞理工學院,廣東東莞
卷  號 45
發表年份 2017
發表刊期 15
發表頁面 57-59,84
關  鍵  字 諾如病毒;逆轉錄;環介導等溫擴增,
摘  要 [目的]基于諾如病毒(NV)基因保守區,設計一套RT-LAMP簡并引物,建立能簡便、特異、靈敏檢測水環境樣品中NV的一步法RT-LAMP技術。[方法]通過試驗,優化反應溫度(64 ℃)、反應時間(40 min)、Mg2+濃度(2 mmol/L)等參數,建立反應體系。[結果]該方法只需1臺水浴鍋在1 h內即可完成檢測,可直接用肉眼觀察結果,檢測靈敏度比普通RT-PCR高100倍;簡并引物的設計增強了特異性,可檢測多個血清型的NV。[結論]在樣品檢測中,RT-LAMP技術的靈敏度達97.7%,高于RT-PCR的90.7%,更適用于野外樣品和簡陋實驗室的快捷檢測。
附  件 水環境中諾如病毒RT-LAMP快速檢測方法的建立及應用
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