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2018年12期
米蝦鞣化激素的表達特征分析及體外合成
| 作 者 | 任麗琦，翁潔羊，王鑫，孫金生，李冉 |
| 第一作者 | 任麗琦 |
| 作者單位 | 天津師范大學生命科學學院，天津市動植物抗性重點實驗室，天津 |
| 卷 號 | 46 |
| 發表年份 | 2018 |
| 發表刊期 | 12 |
| 發表頁面 | 112-117 |
| 關 鍵 字 | 米蝦；鞣化激素；原核表達；組織表達；實時熒光定量PCR, |
| 摘 要 | ［目的］觀察米蝦的胚胎發育過程。制備米蝦發育過程中鞣化激素(Bursicon)的α和β這2個亞基基因蛋白并探討其在不同組織中的表達特征。［方法］利用光學顯微鏡觀察米蝦的胚胎發育過程。根據轉錄組提示，PCR擴增2個亞基基因的編碼區。目的片段經雙酶切后分別連入載體pET-28a-c(+)中，構建表達載體pET-28a-α、pET-28a-β。重組質粒轉入Rosetta表達菌后用IPTG誘導其表達。采用實時熒光定量PCR檢測bursicon-α和bursicon-β在米蝦的眼柄、心、胸神經節和腹神經節4個組織中的表達差異。［結果］米蝦胚胎發育階段包括卵裂期、囊胚期、原腸期、前無節幼體期、后無節幼體期、復眼色素形成期以及蚤狀幼體期共7個階段。SDS-PAGE凝膠電泳檢測發現體外原核系統能夠成功表達Bursα和Bursβ，二者的相對分子質量約為15 kD。此外表達特征分析顯示bursicon-α和bursicon-β在米蝦腹神經節中的相對表達量最高，胸神經節中的相對表達量次之，在眼柄和心中的相對表達量較低。［結論］米蝦中鞣化激素的2個亞基基因主要是在其腹神經節中表達，屬于神經多肽激素，能夠分泌到血淋巴中發揮調節作用；體外原核表達系統獲得重組蛋白Bursα和Bursβ，為進一步研究其功能及應用于生產奠定了基礎。 |
| 附 件 |
米蝦鞣化激素的表達特征分析及體外合成
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