2018年13期

玉葉金花SSR-PCR體系的優化

作  者 鄭艷,胡章立,陳濤
第一作者 鄭艷
作者單位 深圳大學生命與海洋科學學院,廣東深圳
卷  號 46
發表年份 2018
發表刊期 13
發表頁面 98-103
關  鍵  字 玉葉金花;正交設計;SSR分子標記;PCR體系優化,
摘  要 [目的]優化玉葉金花SSR-PCR擴增反應體系。[方法]以紅紙扇為材料,采用正交設計和單因素試驗方法,從Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA濃度以及退火溫度4個方面對玉葉金花SSR-PCR體系進行優化,并采用4對SSR引物和4種玉葉金花植物樣品進行驗證。[結果]玉葉金花20 μL的 SSR-PCR反應最優體系為Mg2+濃度1.50 mmol/L、dNTPs濃度0.150 mmol/L、引物濃度0.45 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.00 U、模板DNA 15 ng、退火溫度53.4 ℃。[結論]該反應體系的擴增條帶清晰、穩定、重復性好,可用于玉葉金花的SSR分子標記開發、物種分子鑒定、遺傳多樣性分析和譜系關系構建等相關研究。
附  件 玉葉金花SSR-PCR體系的優化
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