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2018年17期
春蘭SRAP-PCR反應體系的建立與優化
| 作 者 | 袁媛，孫葉，李風童，包建忠，陳秀蘭 |
| 第一作者 | 袁媛 |
| 作者單位 | 江蘇里下河地區農業科學研究所，江蘇揚州 |
| 卷 號 | 46 |
| 發表年份 | 2018 |
| 發表刊期 | 17 |
| 發表頁面 | 105-107 |
| 關 鍵 字 | 春蘭；SRAP-PCR；正交試驗設計；體系優化, |
| 摘 要 | ［目的］構建適合春蘭SRAP-PCR反應的最佳體系。［方法］對影響PCR反應的5個變量（dNTPs濃度、Mg2+濃度、引物濃度、Taq酶量、模板DNA用量）采用L16（45）正交試驗設計，建立春蘭SRAP-PCR最適反應體系。［結果］最佳優化體系為0.25 mmol/L dNTPs、250 mmol/L Mg2+、0.80 μmol/L引物、1.00 UTaq酶、200.00 ng模板DNA，共20 μL。擴增程序：94 ℃預變性4 min，反應前5個循環在94 ℃變性1 min、35 ℃復性1 min、72 ℃延伸1 min的條件下運行，隨后的30個循環復性溫度提高至50 ℃，最后72 ℃延伸10 min。［結論］該體系有利于SRAP分子標記在春蘭材料上的應用，為春蘭分子遺傳育種奠定了基礎。 |
| 附 件 |
春蘭SRAP-PCR反應體系的建立與優化
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