2018年20期

一個耐硒基因過表達載體的構建及轉基因植株的篩選鑒定

作  者 錢靚雯,歐陽劍,孟云,樊婷婷
第一作者 錢靚雯
作者單位 合肥工業大學食品科學與工程學院,安徽合肥
卷  號 46
發表年份 2018
發表刊期 20
發表頁面 86-88
關  鍵  字 擬南芥;WRKY47基因;過表達;轉基因植株,
摘  要 [目的]進一步驗證WRKY47基因在調控硒脅迫應答中的功能,構建WRKY47過表達載體,獲得相應的轉基因株系。[方法]以野生型擬南芥的cDNA為模板,利用PCR擴增WRKY47基因全長,將該基因連接到pBI121載體上。將獲得的重組載體轉化至農桿菌菌株GV3101,通過浸化轉化法將WRKY47重組質粒轉化到擬南芥野生型植株中,利用轉基因篩選與遺傳鑒定獲得WRKY47轉基因陽性植株。[結果]擴增獲得WRKY47基因,CDS全長1 470 bp,連接轉化并獲得測序正確的重組載體pBI121-WRKY47。通過抗性篩選和分子鑒定獲得陽性轉基因植株。[結論]成功構建過表達載體并獲得相應的轉基因株系,為進一步研究該基因的分子機制奠定基礎。
附  件 一個耐硒基因過表達載體的構建及轉基因植株的篩選鑒定
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