2019年02期

慢病毒介導PNX沉默細胞株的構建與鑒定

作  者 丁毅飛,曹春雨,王憑青
第一作者 丁毅飛
作者單位 重慶大學生物工程學院,重慶
卷  號 47
發表年份 2019
發表刊期 2
發表頁面 94-95,110
關  鍵  字 慢病毒;PNX;生殖
摘  要 [目的]構建慢病毒介導的PNX沉默載體,感染GnRH分泌細胞(GT1-7)后進行篩選鑒定,獲得穩定的PNX沉默細胞株。[方法]結合RNAi干擾技術構建出慢病毒沉默載體,在293T細胞中包裝病毒并測定滴度。感染GnRH分泌細胞(GT1-7),嘌呤霉素篩選得到穩定細胞后利用Real-time PCR和Western blot檢測PNX沉默效果。[結果]慢病毒介導的PNX沉默載體構建成功,包裝的慢病毒成功感染GT1-7細胞,并且Real-time PCR和Western blot證實了PNX沉默細胞株的PNX沉默效果。[結論]成功構建了慢病毒介導的PNX沉默細胞株,為以后探索PNX對動物生殖發育的作用打下了基礎。
附  件 慢病毒介導PNX沉默細胞株的構建與鑒定
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