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2019年02期
ERO1α慢病毒過表達載體的構建及其在RAW264.7細胞中穩定表達
| 作 者 | 戴安娜，胡佳慧，屈玉杏，劉婉洋，許顯玉，陳風雷 |
| 第一作者 | 戴安娜 |
| 作者單位 | 揚州大學獸醫學院，江蘇揚州 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 2 |
| 發表頁面 | 89-93 |
| 關 鍵 字 | 慢病毒；ERO1α；過表達；RAW264.7細胞 |
| 摘 要 | ［目的］構建小鼠ERO1α基因慢病毒過表達載體，并篩選其在RAW264.7細胞中穩定表達。［方法］利用PCR方法擴增ERO1α基因的CDS區并測序；將目的片段亞克隆到慢病毒過表達載體pCD513B-1上，構建pCD513B-ERO1α慢病毒過表達載體；通過病毒包裝產生慢病毒并轉導RAW264.7細胞；轉導后的細胞進行嘌呤霉素抗性篩選，獲得穩定表達的細胞；利用RT-qPCR和Western blot方法檢測ERO1α的表達效果。［結果］ERO1α慢病毒過表達載體構建成功，病毒滴度為5×106~10×106 TU/mL；慢病毒成功轉導RAW264.7細胞并且穩定高表達。［結論］成功構建ERO1α慢病毒過表達載體，并在RAW264.7細胞中穩定高表達，為進一步研究ERO1α在免疫系統中的功能提供了技術支持。 |
| 附 件 |
ERO1α慢病毒過表達載體的構建及其在RAW264.7細胞中穩定表達
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