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2019年02期
擬南芥SPM12基因GFP載體構建及轉基因植株篩選
| 作 者 | 方雪，徐潔娜，孟杏楠，曹樹青，樊婷婷 |
| 第一作者 | 方雪 |
| 作者單位 | 合肥工業大學食品與生物工程學院，安徽合肥 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 2 |
| 發表頁面 | 86-88 |
| 關 鍵 字 | 擬南芥；SPM12；載體；GFP轉基因植株 |
| 摘 要 | ［目的］為了進一步研究SPM12基因的功能，利用哥倫比亞（Columbia，Col）遺傳背景的野生型擬南芥材料構建SPM12基因GFP載體及其轉基因植株。 ［方法］ 以野生型擬南芥的RNA反轉錄成的 cDNA為模板，PCR擴增出SPM12基因的CDS全長序列，將其連接到GFP載體的質粒上；然后將構建成功的重組質粒轉化到大腸桿菌DH5α受態細胞中，挑取陽性菌落經PCR鑒定并測序后，將其質粒轉入農桿菌GV3101感受態細胞中。PCR鑒定出陽性菌落后，通過浸花法將其轉入野生型擬南芥植株中。收種子后，使用帶有抗性的選擇性培養基篩選出陽性植株。［結果］通過SPM12基因CDS片段和SPM12-GFP重組質粒的獲得，構建了SPM12-GFP載體和其轉基因植株。 ［結論］成功獲得擬南芥SPM12-GFP轉基因植株，為進一步研究擬南芥SPM12基因的功能與分子機制奠定了基礎。 |
| 附 件 |
擬南芥SPM12基因GFP載體構建及轉基因植株篩選
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