2021年03期

絲瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因編輯載體的構建

作  者 陳敏氡,王彬,劉建汀,葉新如,曾美娟,朱海生,溫慶放,康玉妹
第一作者 陳敏氡
作者單位 福建省農業科學院作物研究所,福建福州
卷  號 49
發表年份 2021
發表刊期 3
發表頁面 105-109
關  鍵  字 絲瓜;LcPPO1基因;CRISPR/Cas9技術;基因編輯
摘  要 [目的]通過CRISPR/Cas9系統構建絲瓜LcPPO1基因編輯載體。[方法]根據前期已經克隆得到的LcPPO1基因序列,設計2個sgRNA靶位點序列,退火制備sgRNA雙鏈,分別與線性PCA1301-Cas9載體連接獲得2個重組載體,將重組載體轉化DH5α感受態細胞,再對其進行PCR鑒定及測序比對分析。[結果]2個sgRNA靶位點序列已經分別準確地連入PCA1301-Cas9載體,插入序列無突變。[結論]成功構建了絲瓜LcPPO1基因編輯載體PCA1301-Cas9-sgRNA1和PCA1301-Cas9-sgRNA2,為后續研究絲瓜LcPPO1基因功能奠定了基礎。
附  件 絲瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因編輯載體的構建
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