2022年03期

一種牛肉檢測的熒光實時定量方法研究

作  者 馬建榮,余永紅,何遠財,張雅慧,譚杰峰,崔水龍,許錦濤
第一作者 馬建榮
作者單位 廣東食品藥品職業學院,廣東廣州
卷  號 50
發表年份 2022
發表刊期 3
發表頁面 198-200
關  鍵  字 牛源性成分;熒光實時定量方法;引物特異性;靈敏度;精密度
摘  要 [目的]開發一種用于牛源性成分檢測的熒光實時定量檢測方法。[方法]通過序列比對后,以牛源性線粒體DNA中cytb基因為模板,設計特異性的引物和探針,并以不同來源的DNA為模板,分析引物和探針的特異性。對牛源性DNA進行梯度稀釋后,分析不同濃度下擴增曲線,分析檢測方法的靈敏度。以牛源性DNA稀釋液為模板,進行10個平行擴增試驗,分析檢測方法的精密度。[結果]該研究所用的引物和探針對牛源性DNA具有明顯的擴增曲線,而對非牛源性(雞、鴨、豬、人)DNA模板不進行擴增。靈敏度分析結果顯示,該檢測方法對濃度僅為24.4 pg/μL牛源性DNA模板仍進行陽性擴增。精密度分析顯示,10個平行試驗擴增曲線相似,Ct值的標準差(SD)僅為0.41,精密度(CV)也僅為1.6%。[結論]該研究開發的牛肉成分檢測的熒光實時定量方法特異性高,僅對牛源性DNA發生擴增。同時該方法靈敏度也很好,檢出限為24.4 pg/μL,精密度也很高,重復性良好,適用于市場上肉制品中牛源性成分的檢測。
附  件 一種牛肉檢測的熒光實時定量方法研究
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