2022年12期

馬達加斯加龍樹實時熒光定量PCR鑒定方法的研究

作  者 李井干,吳晶,伏建國,楊曉軍,張明哲
第一作者 李井干
作者單位 南京海關動植物與食品檢測中心,江蘇南京
卷  號 50
發表年份 2022
發表刊期 12
發表頁面 168-170
關  鍵  字 馬達加斯加龍樹;實時熒光定量PCR;鑒定
摘  要 [目的]通過設計特異性引物與熒光探針,建立馬達加斯加龍樹(Didierea madagascariensis)實時熒光定量PCR鑒定方法。[方法]提取26份龍樹科植物基因組,并用內源基因檢測DNA質量;根據GenBank中已發表的馬達加斯加龍樹的PEPC基因序列,設計特異性引物與熒光探針,通過檢測26份供試樣本,檢測該方法的特異性;將樣品DNA進行10倍梯度稀釋,以檢測實時熒光定量PCR方法的靈敏度。[結果]只有3份馬達加斯加龍樹樣本出現典型的擴增曲線,其他23份龍樹科植物無典型的擴增曲線;核酸原液與10-1~10-4倍稀釋液樣本均能夠得到典型擴增曲線,標準曲線的決定系數(R2)為0.995,檢測限量為5.2×10-3 ng/μL。[結論]該方法特異性強、靈敏度高,可有效地應用于馬達加斯加龍樹的鑒定。
附  件 馬達加斯加龍樹實時熒光定量PCR鑒定方法的研究
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