重組NADH氧化酶對乳酸脫氫酶乳酸氧化活性的影響

作  者 趙蕊, 霍貴成
第一作者 趙蕊
作者單位 東北農業大學,乳品科學教育部重點實驗室,黑龍江哈爾濱
卷  號 41
發表年份 2013
發表刊期 5
發表頁面 1918-1919,1927
關  鍵  字 乳酸菌;乳酸脫氫酶;NADH氧化酶
摘  要 [目的]考察當存在其他利用NADH途徑時,發酵型乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)催化乳酸氧化能力的改變。[方法]PCR擴增乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)中生成H2O的NADH氧化酶基因noxE,將其連接至表達載體并在大腸桿菌中過量表達;對親和純化的產物進行SDS-PAGE分析、光譜掃描和活性測定,考察純化產物是否具有生物學活性;以2,4-二硝基苯肼法測定乳酸脫氫酶的乳酸氧化活性,考察添加NoxE重組蛋白對其活性的影響。[結果]重組NoxE蛋白是種黃素蛋白,具明顯的生物學活性,說明noxE表達載體構建成功;添加NoxE后,LDH的乳酸氧化活性提高了3.84倍。[結論]在NADH經呼吸鏈代謝掉的生理條件下,LDH催化乳酸氧化的能力會明顯提高。
附  件 重組NADH氧化酶對乳酸脫氫酶乳酸氧化活性的影響
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