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2013年5期
菜豆莢斑駁病毒外殼蛋白基因的克隆與原核表達
| 作 者 | 魏曉棠，白樺，尼秀媚，張京宣，宋濤 |
| 第一作者 | 魏曉棠 |
| 作者單位 | 山東出入境檢驗檢疫局，山東青島 |
| 卷 號 | 41 |
| 發表年份 | 2013 |
| 發表刊期 | 5 |
| 發表頁面 | 1916-1917，2164 |
| 關 鍵 字 | 菜豆莢斑駁病毒；外殼蛋白；表達 |
| 摘 要 | ［目的］克隆菜豆莢斑駁病毒（BPMV）外殼蛋白（CP）基因，并對其進行原核表達。［方法］利用RTPCR方法克隆BPMV CP基因，將其連接至pMD19T Simple載體后對陽性克隆進行測序，檢測其與已知病毒外殼蛋白基因序列的同源性；將CP基因定向插入雙酶切的pET30a，構建其原核表達載體并轉化大腸桿菌BL21表達重組蛋白。［結果］試驗克隆得到的CP基因大小為1 122 bp，與NCBI中目標基因的相似度達99%以上；試驗成功構建了原核表達載體pET30aBPMV CP，發現重組蛋白在37 ℃、1.0 mmol/L IPTG誘導4 h條件下表達量最高。［結論］該研究為BPMV抗血清的制備與液相芯片檢測方法的建立奠定了基礎。 |
| 附 件 |
菜豆莢斑駁病毒外殼蛋白基因的克隆與原核表達
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