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2014年12期
roGFP1探針在玉米幼胚中響應細胞氧化還原狀態改變的初步研究
| 作 者 | 吳佳梅，劉曉寧，趙軍 |
| 第一作者 | 吳佳梅 |
| 作者單位 | 蘭州大學草地農業科技學院，甘肅蘭州 |
| 卷 號 | 42 |
| 發表年份 | 2014 |
| 發表刊期 | 12 |
| 發表頁面 | 3491-3493，3496 |
| 關 鍵 字 | roGFP1；熒光強度比值；玉米；瞬時表達；穩定轉化 |
| 摘 要 |
［目的］建立roGFP1探針響應玉米體內氧化還原狀態變化的穩定表達系統。［方法］首先利用基因槍介導玉米幼胚轉化法瞬時表達roGFP1基因，利用激光共聚焦顯微鏡405和488 nm激發光通道對10 mmol/L H2O2和2 mmol/L DTT溶液處理下的幼胚進行510 nm的GFP熒光成像，后通過ImageJ處理圖像和分析熒光比值［405/488 nm］；同時利用農桿菌介導玉米幼胚轉化法開展roGFP1基因的玉米穩定轉化，進行Southern Blot鑒定和熒光顯微鏡觀察。［結果］在玉米幼胚瞬時表達系統中，經10 mmol/L H2O2處理后，roGFP1探針的熒光強度比值［405/488 nm］由原來的0.844升高至1.837，而在2 mmol/L DTT溶液處理下的熒光強度比值下降至0.911；經Southern Blot鑒定和GFP熒光檢測獲得了roGFP1轉基因陽性植株。［結論］在玉米幼胚瞬時表達系統中，roGFP1探針能夠響應由外源氧化還原劑引起的體內氧化還原狀態改變；獲得了表達roGFP1的轉基因玉米植株。 |
| 附 件 |
roGFP1探針在玉米幼胚中響應細胞氧化還原狀態改變的初步研究
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