作 者 | 婁婧婧,陳偉民,趙廣才 |
第一作者 | 婁婧婧 |
作者單位 | 廣州市體育科學研究所,廣東廣州 |
卷 號 | 42 |
發表年份 | 2014 |
發表刊期 | 23 |
發表頁面 | 7769-7772 |
關 鍵 字 | 斑馬魚;IL10蛋白;S2細胞;真核表達 |
摘 要 |
[目的]在昆蟲S2細胞中重組表達斑馬魚IL10蛋白。[方法]PCR擴增斑馬魚IL10蛋白編碼基因,連接到分泌表達載體pMT/Bip/V5-His A中與輔助質粒pCoBlast共轉染S2昆蟲胚胎細胞,通過Blasticidin加壓篩選,獲得穩定表達斑馬魚IL10的細胞系。用硫酸銅誘導IL10蛋白表達,收集無血清的細胞表達上清,采用SDSPAGE及Western鑒定目的蛋白。[結果]目的蛋白在昆蟲細胞中獲得表達,SDSPAGE結果表明相對分子質量為23 kD,與預期結果相一致。[結論]獲得了重組斑馬魚IL10蛋白,為進一步在蛋白水平上研究其功能和調控機制奠定了基礎。 |
附 件 | 重組斑馬魚IL10蛋白的真核表達 |
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