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2016年10期
豬瘟病毒E0蛋白在PK15中的表達與鑒定
| 作 者 | 周景明，劉芳冰，祁艷華，張改平，栗寧，王愛萍 |
| 第一作者 | 周景明 |
| 作者單位 | 鄭州大學生命科學學院，河南鄭州 |
| 卷 號 | 44 |
| 發表年份 | 2016 |
| 發表刊期 | 10 |
| 發表頁面 | 160-162,186 |
| 關 鍵 字 | 豬瘟病毒；E0蛋白；增強型綠色熒光蛋白；PK15細胞, |
| 摘 要 | ［目的］研究豬瘟病毒（CSFV）E0基因在PK15細胞中的表達特性。［方法］通過PCR方法克隆了E0基因全長681 bp的片段，連接到真核表達載體pEGFPC1上，構建出重組質粒并進行雙酶切鑒定。［結果］成功構建出重組質粒pEGFPE0。通過雙酶切鑒定，PCR鑒定和測序確定了目的基因大小一致，插入位置完全正確后，利用Lipofecta mine 2000轉染試劑盒將重組質粒轉染到豬腎細胞PK15中，轉染48 h后在熒光顯微鏡下觀察，可以看到大多數細胞呈現出綠色熒光，說明轉染成功。通過G418篩選后，在熒光顯微鏡下仍能觀察到部分細胞能夠呈現出綠色熒光，這表明重組融合蛋白pEGFPE0在PK15細胞中得到了表達。［結論］獲得的能夠表達重組融合蛋白的細胞克隆，為進一步大量表達與純化E0糖蛋白、制備其單抗以及研究豬瘟病毒E0糖蛋白的生物學功能奠定了基礎。 |
| 附 件 |
豬瘟病毒E0蛋白在PK15中的表達與鑒定
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