2016年33期

珊瑚菜葉綠體基因TrnV-M序列的PCR擴增與分析

作  者 慕春歌
第一作者 慕春歌
作者單位 魯東大學資產處,山東煙臺
卷  號 44
發表年份 2016
發表刊期 33
發表頁面 135-136,154
關  鍵  字 珊瑚菜;TrnV-M;PCR擴增;最佳反應體系,
摘  要 [目的]對珊瑚菜TrnV-M基因片段PCR擴增條件進行優化和測序分析,為瀕危物種珊瑚菜的種質資源保護和遺傳多樣性研究提供理論依據。[方法]探索并優化珊瑚菜葉綠體基因片段TrnV-M的PCR擴增條件,并對擴增產物進行測序分析。[結果]珊瑚菜TrnV-M基因片段的PCR最佳反應體系:dNTPs 0.50 μL,Buffer 2.50 μL,TrnM 1.25 μL,TrnV 1.25 μL,DNA 1.00 μL,rTaqE 0.15 μL,ddH2O 18.35 μL,總體積25.00 μL。最佳擴增程序:94 ℃預變性3.0 min;94 ℃變性50 s,58 ℃退火45 s,72 ℃延伸1 min 25 s,38個循環;72 ℃延伸8 min。[結論]在最優體系下獲得了清晰、穩定的目的條帶,校正后條帶長度約為757 bp,通過 GenBank 的 BLAST 比對,確定為TrnV-M基因片段。
附  件 珊瑚菜葉綠體基因TrnV-M序列的PCR擴增與分析
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