作 者 | 撒云俐,那冬晨 |
第一作者 | 撒云俐 |
作者單位 | 山西師范大學生命科學學院,山西臨汾 |
卷 號 | 44 |
發表年份 | 2016 |
發表刊期 | 33 |
發表頁面 | 137-139,142 |
關 鍵 字 | 山楂;PCR-SSCP;引物;反應體系;反應條件, |
摘 要 | [目的]優化山楂PCR-SSCP反應體系與反應條件。[方法]以山楂為材料,采用改良的CTAB法分步提取葉綠體DNA和核DNA,對PCR-SSCP引物進行篩選,同時進行PCR-SSCP反應體系和反應條件的優化,瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物,非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測變性后的PCR擴增產物。[結果] ropB、ropL、rpoC1、ITS2、psbA-trnH 5對引物適用于山楂PCR-SSCP分析。電泳時,采用6%聚丙烯酰胺凝膠(交聯度29∶1),4 ℃恒溫,200 V恒壓,上樣緩沖液(不含甘油)與PCR產物等量混合,98 ℃堿(1%NaOH)變性15 min,電泳緩沖液為0.5×TBE,電泳3~4 h可得到較好的山楂PCR-SSCP電泳圖譜。[結論]建立了山楂PCR-SSCP最優反應體系與反應條件,為山楂SSCP分析奠定基礎。 |
附 件 |
山楂PCR-SSCP反應體系與反應條件的優化![]() |
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