2017年23期

TaqMan定量PCR檢測水稻中外源基因含量

作  者 史慶玲,徐立新,閆 瑾,肖琳琳
第一作者 史慶玲
作者單位 河南省種子管理站,河南鄭州
卷  號 45
發表年份 2017
發表刊期 23
發表頁面 123-124
關  鍵  字 TaqMan定量PCR;轉基因;水稻;拷貝數,
摘  要 [目的]采用TaqMan定量PCR技術檢測水稻中外源基因含量。[方法]采用TaqMan定量PCR技術以編碼磷脂酶D基因PLD為內標準基因,檢測轉基因水稻中外源TT51-1的含量。利用DNA梯度稀釋法分別求內標準基因PLD和TT51-1的Ct值與拷貝數對數值的標準曲線方程,并將得到的Ct值代入標準曲線方程求取樣品中外源基因的拷貝數。[結果]內標準基因PLD標準曲線方程為y=-3.403x+39.939,R2=0.993;TT51-1基因標準曲線方程為y=-3.35x+37.37,R2=0.991,轉基因含量為1.21%,不確定度為0.45。[結論]TaqMan定量PCR技術可以用于確定轉基因作物外源基因含量。
附  件 TaqMan定量PCR檢測水稻中外源基因含量
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