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2018年28期
豬圓環病毒2型REP蛋白的原核表達及免疫原性鑒定
| 作 者 | 徐萍，范娟，葉正琴，魏榮榮，宋慶慶，丁國偉 |
| 第一作者 | 徐萍 |
| 作者單位 | 揚州優邦生物藥品有限公司，江蘇揚州 |
| 卷 號 | 46 |
| 發表年份 | 2018 |
| 發表刊期 | 28 |
| 發表頁面 | 84-87 |
| 關 鍵 字 | PCV-2；REP蛋白；原核表達；免疫原性, |
| 摘 要 | ［目的］開發和研制鑒別豬圓環病毒疫苗免疫和野毒感染的ELISA檢測試劑盒。［方法］根據NCBI數據庫錄入的2型豬圓環病毒（porcine circovirus 2，PCV-2）REP蛋白序列（GenBank登錄號為KX828581）設計引物，利用PCR擴增REP蛋白全長基，構建原核表達載體pET-28a-rep，轉化大腸桿菌BL21（DE3）感受態細胞，并誘導重組蛋白表達。［結果］經過SDS-PAGE分析，獲得了大小約40 ku的目的蛋白，與理論大小相一致。重組蛋白經鎳柱純化后重組蛋白濃度為40 μg/mL，純度約95%。Western Blot及ELISA鑒定結果顯示，該重組蛋白具有良好的免疫原性和反應原性。［結論］鑒于該重組蛋白具有良好的免疫原性及反應原性，該重組蛋白可為開發區分豬圓環病毒2型疫苗免疫和野毒感染的檢測試劑盒奠定基礎。 |
| 附 件 |
豬圓環病毒2型REP蛋白的原核表達及免疫原性鑒定
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