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2020年05期
薏苡黑穗病快速檢測方法研究
| 作 者 | 王健，楊成龍，楊小雨，周明強 |
| 第一作者 | 王健 |
| 作者單位 | 貴州省農業科學院亞熱帶作物研究所，貴州興義 |
| 卷 號 | 48 |
| 發表年份 | 2020 |
| 發表刊期 | 5 |
| 發表頁面 | 197-200 |
| 關 鍵 字 | 薏苡黑穗病；抗體；酶聯免疫反應 |
| 摘 要 | 以薏苡黑穗病菌粉胞內蛋白為免疫原，制備抗體，建立薏苡黑穗病ELISA檢測方法。結果表明，測定純化后抗體的最高效價為1∶800 000，具特異性強；方陣試驗測定抗原的最佳包被濃度為103 CFU/mL，抗體的工作濃度為1∶4 000；優化ELISA檢測條件，確定抗體4 ℃過夜（8～12 h）包被效果最好，選擇1%酪蛋白作為抗體的封閉液，抗體的最佳封閉時間為 1.5 h，抗體的最佳孵育時間為2.5 h，最佳底物作用時間為15 min；建立ELISA標準工作曲線，表明抗體的靈敏度為104 CFU/mL。ELISA檢測田間采集的黑穗病病葉顯示，抗體可與病葉提取液發生特異性反應,而與健康葉提取液呈陰性反應,由此可確定黑穗病的存在與否。該方法可用于田間薏苡黑穗病快速檢測，以及時指導病害防治。 |
| 附 件 |
薏苡黑穗病快速檢測方法研究
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